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超氧陰離子清除能力測試盒

簡要描述:超氧陰離子清除能力測試盒 上海牧榮生物科技有限公司專業實驗室產品.為客戶全面解決實驗、生產、開發需求,提供方便、快捷的服務。

  • 產品型號:
  • 廠商性質:代理商
  • 更新時間:2024-05-08
  • 訪  問  量:142

詳細介紹

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應用領域醫療衛生,化工,生物產業,農業,制藥

超氧陰離子清除能力測試盒

微量法100T/96S

注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義

超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質、蛋白質、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細胞結構和功能的破壞,與機體衰老和病變有很密切的關系,清除超氧陰離子自由基的研究已經得到了廣泛的關注。

測定原理

AP-TEMED系統產生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應生成NO2-,NO2-與對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負相關。

自備實驗用品及儀器

天平、研缽、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

試劑組成和配制

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體1.5mL×1支,4℃避光保存。

試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加6mL蒸餾水充分溶解。

試劑三:液體7.5mL×1瓶,4℃保存。

試劑四:液體7.5mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑五:液體7.5mL×1瓶,4℃避光保存。

樣品處理

組織:按照質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測。

細胞:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測。

培養液或其它液體:直接檢測。

粉劑藥物可配制成相同濃度,比如1mg/mL。

測定操作


對照管

測定管

試劑一(μL)

10

10

試劑二(μL)

40

40

H2O(μL)

25


充分混勻,25℃反應1min

樣品(μL)


25

試劑三(μL)

50

50

充分混勻,37℃反應30min

試劑四(μL)

50

50

試劑五(μL)

50

50

充分混勻,37℃顯色20min,于微量石英比色皿/96孔板,在530nm處測定對照管和測定管的吸光值,分別記為A對照管和A測定管。

注意:對照管只需測定一次。

 

計算公式

超氧陰離子清除率 I%=

注意事項

  1. 試劑一4℃可保存2個月,配制好的試劑二4℃可保存一周,建議實驗前配制,并盡快使用。

  2. 樣品處理完后立即進行測定,或者低溫保存不超過24小時。


上海牧榮生物科技有限公司

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超氧陰離子清除能力測試盒



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