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PNA寡核苷酸處理方案
PNA寡核苷酸處理方案 2024-08-08

1.PNA具有較高的親和力和特異性。2.富含嘌呤的PNA低聚物的溶解度降低,并傾向于聚集。建議低聚物的嘌呤含量低于50%,在PNA夾中一個低聚物的嘌呤(特別是G堿段不超過6段),因為水溶性非常重要。可以添加兩個賴氨酸來提高長PNA或具有高嘌呤的PNA的溶解度。存儲和處理1.PNA...

  • 含有伯氨基的生物分子的 NHS 酯標記介紹 2024-03-13

    NHS(N-羥基琥珀酰亞胺)酯和其他活化酯(磺基-NHS、磺基四氟苯基-STP)是適合氨基修飾的反應性化合物。NHS是最常見的活化酯類型。常見的修飾是熒光標記、熒光猝滅劑和其他報告基團。可以使用活化酯連接炔烴和疊氮基,以使生物分子適應點擊化學。尤其常見的是蛋白質和肽的修飾,因為它們幾乎總是含有氨基。其他例子是氨基寡核苷酸的修飾、氨基修飾的DNA和含氨基的糖。NHS酯與氨基的反應強烈依賴于pH值:在低pH值下,氨基被質子化,并且不會發生修飾。在高于最佳pH值時,NHS酯的水解速...

  • 蛋白質和其他硫醇化生物分子的馬來酰亞胺標記 2024-03-13

    硫醇與馬來酰亞胺的反應是廣泛用于生物共軛和標記生物分子(包括蛋白質和肽)的過程。它按照以下方案進行:馬來酰亞胺是對硫醇表現出高選擇性的親電子化合物。雖然馬來酰亞胺在自然界中幾乎不存在,但硫醇卻非常豐富。它們以半胱氨酸殘基形式存在于蛋白質和肽中。盡管天然DNA不含硫醇,但具有硫醇基團的合成寡核苷酸可以很容易地制備。硫醇易于氧化二聚并形成二硫鍵。因此,半胱氨酸殘基形成二硫鍵,從而穩定蛋白質的三級結構。二硫化物不與馬來酰亞胺反應。因此,有必要在綴合前還原二硫化物并排除反應中的氧氣。...

  • 使用 Pico488 進行 DNA 定量 2024-03-12

    Pico488DNA定量溶液是一種超靈敏試劑,用于在無法通過測量260nm吸光度來確定雙鏈DNA濃度時測量雙鏈DNA濃度。Pico488選擇性地結合雙鏈DNA,因此核苷酸、單鏈DNA、RNA、蛋白質和其他雜質不會妨礙測量。與雙鏈DNA結合的染料在503nm處最大吸收光并在525nm處最大發射光。為了檢測測定讀數,可以使用任何類型的熒光計或熒光板讀數器。Pico488測量DNA濃度的線性范圍為1pg/μL—5ng/μL。為了實現精確、可重復的熒光測量,我們建議在TE緩沖液(10...

  • 炔烴修飾的寡核苷酸與染料疊氮化物的綴合 2024-03-12

    點擊化學緩沖液適用于含有炔烴的寡核苷酸的合成后綴合。帶有末端炔的寡核苷酸可以使用炔亞磷酰胺合成,或者您也可以在我們的網站上訂購修飾寡核苷酸的合成。疊氮化物與修飾寡核苷酸的末端炔綴合,形成五元雜環。這兩個基團(疊氮基和炔烴)在天然生物分子中都極為罕見,因此該反應具有高度特異性,可以有效地處理各種任務。該反應在銅(I)存在下、中性pH值下進行。催化緩沖液含有銅(II)、醋酸三乙銨pH7和DMSO。建議使用新配制的抗壞血酸溶液來還原銅(II)。對于此反應,您將需要炔烴修飾的寡核苷酸...

  • 炔烴或疊氮化物修飾的蛋白質與染料疊氮化物或炔烴的綴合 2024-03-12

    蛋白質標記緩沖液適用于CuAAC與蛋白質的反應,可保護生物分子免受活性氧的損害。該反應可用于具有炔烴或疊氮基團的蛋白質,以及用疊氮基團代謝標記的細胞或細胞裂解物的組分。疊氮化物與末端炔烴綴合,形成五元雜環(1,2,3-三唑)。這兩個基團(疊氮基和炔烴)在天然生物分子中都極為罕見,因此該反應具有高度特異性,可以有效地處理各種任務。該反應在銅(I)化合物存在下進行,幾乎不依賴于pH值。蛋白質標記緩沖液針對蛋白質操作進行了優化,含有銅(II)鹽(催化活性銅(I)化合物的穩定前體)、...

  • 使用點擊化學測定細胞增殖和 DNA 復制 2024-03-12

    細胞增殖測定廣泛應用于細胞毒性研究、癌癥研究和細胞生物學的許多其他領域。其中許多可以通過熒光標記對增殖細胞進行可視化,并且適合高通量篩選。檢測復制的DNA可以說是檢測增殖的最直接方法。這是通過使用溴脫氧尿苷(BrdU)核苷實現的,該核苷在復制過程中融入DNA。然后,細胞DNA中的這些核苷修飾可以通過抗BrdU抗體檢測到。盡管具有特異性,但這種測定方法繁瑣且難以重現,因為需要用刺激性試劑處理細胞,以使DNA暴露于抗體,否則這些抗體不會穿透細胞結構。一種更溫和的替代方案是乙炔基脫...

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