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β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)測試盒

簡要描述:β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)測試盒: 上海牧榮生物科技有限公司專業實驗室產品。一站式"服務模式,為客戶全面解決實驗、生產、開發需求。

  • 產品型號:
  • 廠商性質:代理商
  • 更新時間:2024-05-06
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詳細介紹

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應用領域醫療衛生,化工,生物產業,農業,制藥

β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)測試盒


正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義

β-GD廣泛存在于動物組織中,是一種參與腫瘤侵襲和轉移過程的基質降解酶,具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。該酶在肝細胞中含量較高。此外在胃癌組織中含量豐富,測定胃液β-GD活性對于研究胃癌具有重要的意義。

測定原理

β-GD催化苯酚 β-D-葡萄糖醛酸產生游離的酚酞,通過測定苯酚含量反應該酶活性高低。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:液體2mL×1瓶,4℃保存;

試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2mL蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑仍-20℃保存;

試劑三:液體15mL×1瓶,4℃保存;

試劑四:1μmol/mL標準儲備液10mL,4℃保存;

樣品測定的前處理

按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟

1、分光光度計預熱30min以上,調節波長至540nm,蒸餾水調零。

2、樣本測定

試劑名稱(μL)

加樣孔

測定管

標準管

空白管

試劑一

20

20

20

試劑二

20

20

20

樣本

10



1μmol/mL標準液


10


蒸餾水



10

混勻后,37℃反應30min

試劑三

150

150

150

混勻, 540nm下測定各管吸光值

注意:標準管和空白管只需測一次。

β-GD活性計算

(1)按樣本鮮重計算:

單位定義:每小時每g鮮重樣品中催化產生 1μmol酚酞的量為一個活力單位。

β-GD(μmol/h/g 鮮重)= (C標準管×V1)×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=2×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷W

(2)按樣本蛋白濃度計算:

單位定義:每小時每mg組織蛋白催化產生 1μmol酚酞的量為一個活力單位。

β-GD(μmol/h/mg prot)= (C標準管×V1)×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷(V1×Cpr)÷T=2×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷Cpr

C標準管:標準管濃度, 1μmol/mL;V1:加入樣本體積:0.01mL;V2:加入提取液體積,1mL;T:反應時間,0.5h;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g。

上海牧榮生物科技有限公司

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β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)測試盒




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