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重組人層粘連蛋白及其在細胞培養中的應該

更新時間:2023-07-03      點擊次數:508

層粘連蛋白是所有動物中發現的一系列細胞外基質 (ECM) 蛋白。這些糖蛋白是基底膜基底層的主要成分,基底膜是一種蛋白質網絡,構成了體內大多數細胞和器官生長的基礎。在體內,層粘連蛋白對于調節許多生物過程很重要,包括粘附、遷移和分化。1,2

層粘連蛋白是異三聚體蛋白質,由 α 鏈、β 鏈和 γ 鏈以 1:1:1 的比例組成。3總共有 5 種 α 鏈異構體、3 種 β 鏈異構體和 3 種 γ 鏈異構體是已知的,并且特定的組合調節特定層粘連蛋白分子的功能。不同的層粘連蛋白由存在的異構體的組合來確認圖1)。例如,層粘連蛋白-511表示由α5、β1和γ1亞基組成的層粘連蛋白。

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層粘連蛋白直接與動物細胞細胞膜中的整合素蛋白相互作用。這種相互作用是細胞與基底膜結合的主要組成部分之一。層粘連蛋白的蛋白水解研究已經鑒定出層粘連蛋白三聚體的蛋白酶抗性核心,稱為 E8 片段,其中包含核心整合素結合結構域(圖 1)。4 E8片段非常適合體外實驗,因為它們適合高產重組蛋白生產,不像全長層粘連蛋白,全長層粘連蛋白在體外表達具有挑戰性,并且由于其尺寸大且結構復雜,難以形成活性異三聚體-翻譯修飾。

重組人 E8 片段已被多家公司商業化,其中包括 Matrixome(日本大阪),因為它們是培養多種細胞類型的理想底物。 Matrixome 的成立基于以下研究:重組人層粘連蛋白 511 E8 片段(以 iMatrix-511 名稱銷售并可從 REPROCELL 獲得)可形成人類干細胞培養的理想基質。5自 Matrixome 成立以來,Matrixome 已引入了許多其他具有多種細胞特異性的層粘連蛋白 E8 片段亞型( 1)。

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iMatrix-511重組人 Laminin-511 E8 片段已被證明與整合素 α6β1 緊密結合,使其成為培養人類干細胞的理想底物( 2a 和 b)。5原始 iMatrix-511在 CHO-S 細胞中表達,而新版本(稱為iMatrix-511 SILK)在蠶繭中表達。 iMatrix-511 SILK 以更低的價格提供與原始 iMatrix-511 相同的性能,并且沒有動物蛋白的風險。

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其他 iMatrix 層粘連蛋白產品

  • iMatrix 411:層粘連蛋白-411在血管基底膜中豐富,iMatrix-411已用于將誘導多能干細胞(iPSC)分化為血管內皮細胞和膽管細胞。 6

  • iMatrix-221:Laminin-211 存在于肌肉組織的基底膜中。 iMatrix-211 已被證明是心肌細胞和骨骼肌細胞的底物。

  • Matrix-332:Laminin-332 存在于角質形成細胞和角膜細胞中。 iMatrix-332最近被用作角膜細胞分化和純化的關鍵成分。7

  • iMatrix-111:Laminin-111 存在于肝臟中。iPSC體外分化為肝細胞的重要成分。 8




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